Лабораторные методы определения концентрации нейронспецифической енолазы

Лабораторные методы определения концентрации нейронспецифической енолазы (НСЕ) — это ключевой инструмент в диагностике и мониторинге некоторых онкологических и неврологических заболеваний. Анализ представляет собой исследование венозной крови, направленное на измерение уровня специфического фермента, который в норме содержится внутри нейронов и клеток нейроэндокринной системы. Повышение его концентрации в крови сигнализирует о возможном повреждении или активном размножении этих клеток, что требует дальнейшего внимания и обследования со стороны лечащего врача.

Что такое нейронспецифическая енолаза и почему ее уровень важен

Нейронспецифическая енолаза, или НСЕ, — это один из изоферментов гликолитического фермента енолазы. В организме человека он присутствует преимущественно в цитоплазме нейронов головного мозга, периферических нервных волокон и в клетках с нейроэндокринным происхождением. К последним относятся, например, клетки APUD-системы, рассеянные по всему организму, включая легкие, поджелудочную и щитовидную железы.

В здоровом организме концентрация НСЕ в крови крайне низка, так как фермент находится внутри клеток. Однако при разрушении (лизисе) или патологическом разрастании (пролиферации) этих клеток нейронспецифическая енолаза высвобождается в кровоток в больших количествах. Именно поэтому ее уровень служит важным маркером, то есть индикатором, определенных состояний. В первую очередь, анализ на НСЕ ценен в онкологии, особенно при диагностике мелкоклеточного рака легкого, нейробластомы и других нейроэндокринных опухолей. Кроме того, его используют в неврологии для оценки степени повреждения мозговой ткани после травм, инсультов или гипоксии.

Основные лабораторные методы анализа НСЕ

Для определения уровня нейронспецифической енолазы в сыворотке или плазме крови применяются высокочувствительные иммунохимические методы. Наиболее распространенным и стандартизированным является иммуноферментный анализ, который обеспечивает высокую точность и специфичность результатов.

Вот ключевые методы, используемые в современных лабораториях:

• Иммуноферментный анализ (ИФА). Это "золотой стандарт" для определения большинства онкомаркеров, включая НСЕ. Метод основан на реакции "антиген-антитело". В лунки специального планшета вносят антитела, специфичные к нейронспецифической енолазе. Затем добавляют образец сыворотки крови пациента. Если в крови есть НСЕ (антиген), она связывается с этими антителами. После этого добавляют вторые антитела, меченные ферментом, которые вызывают окрашивание раствора. Интенсивность цвета прямо пропорциональна количеству НСЕ в образце. Специальный прибор, спектрофотометр, измеряет эту интенсивность и рассчитывает точную концентрацию.
• Иммунохемилюминесцентный анализ (ИХЛА). Этот метод является более современной и чувствительной вариацией ИФА. Принцип тот же — реакция "антиген-антитело", но вместо цветовой реакции используется люминесценция, то есть свечение. Меткой служит вещество, способное светиться при определенных химических реакциях. Уровень свечения регистрируется прибором (люминометром), что позволяет определять даже очень низкие концентрации вещества с высокой точностью.

Выбор конкретного метода зависит от оснащения лаборатории, но оба подхода обеспечивают надежные результаты для клинической практики. Для пациента сама процедура не меняется — необходимо лишь сдать кровь из вены.

Как правильно подготовиться к сдаче анализа на НСЕ

Точность лабораторного исследования напрямую зависит от правильной подготовки пациента. Нарушение рекомендаций может привести к искажению результатов и, как следствие, к неверной интерпретации со стороны врача. Чтобы обеспечить максимальную достоверность анализа на нейронспецифическую енолазу, важно соблюдать несколько простых правил.

Ниже представлен перечень основных рекомендаций по подготовке к исследованию:

• Сдача крови натощак. Анализ проводится строго натощак. Последний прием пищи должен быть за 8-12 часов до взятия крови. В течение этого периода можно пить чистую негазированную воду.
• Исключение физических и эмоциональных нагрузок. За 24 часа до анализа следует избегать интенсивных тренировок, стрессовых ситуаций и переутомления.
• Отказ от алкоголя и курения. Необходимо полностью исключить прием алкоголя за 24-48 часов до исследования. Курить не рекомендуется как минимум за 1-2 часа до сдачи крови.
• Информирование врача о принимаемых препаратах. Некоторые лекарственные средства могут влиять на результат анализа. Обязательно сообщите лечащему врачу обо всех принимаемых препаратах, чтобы он мог оценить их возможное влияние или порекомендовать временную отмену, если это безопасно.

Соблюдение этих правил помогает минимизировать влияние посторонних факторов и получить наиболее точный показатель концентрации НСЕ в крови.

Интерпретация результатов: что означают показатели нейронспецифической енолазы

Интерпретацию результатов анализа на НСЕ может проводить только квалифицированный врач, учитывая анамнез, клиническую картину и данные других обследований. Категорически недопустимо самостоятельно ставить себе диагноз на основании одного лишь показателя. Нейронспецифическая енолаза не является строго специфичным маркером одного заболевания, и ее повышение может быть вызвано различными причинами.

Референсные значения (норма) могут незначительно отличаться в разных лабораториях в зависимости от используемого оборудования и реагентов. Как правило, нормальным считается уровень НСЕ до 16,3 нг/мл. Повышение этого показателя требует внимательного анализа.

Для лучшего понимания возможных причин изменения уровня НСЕ можно обратиться к следующей таблице.

Крайне важно понимать: повышенный уровень нейронспецифической енолазы — это не диагноз, а сигнал для врача о необходимости проведения дальнейшей, более углубленной диагностики. Например, при подозрении на онкологическое заболевание легких могут быть назначены компьютерная томография (КТ), бронхоскопия и биопсия для подтверждения или опровержения диагноза.

Когда назначают анализ на концентрацию нейронспецифической енолазы

Направление на анализ уровня НСЕ выдается врачом при наличии определенных показаний. Этот тест не используется для массового скрининга населения из-за его недостаточной специфичности. Исследование назначается в конкретных клинических ситуациях для решения диагностических и прогностических задач.

Вот основные случаи, когда может быть рекомендован анализ на НСЕ:

• Диагностика мелкоклеточного рака легкого. При наличии у пациента характерных симптомов (длительный кашель, одышка, кровохарканье) и изменений на рентгенограмме, анализ на НСЕ помогает в дифференциальной диагностике.
• Мониторинг эффективности лечения. У пациентов с уже установленным диагнозом (например, мелкоклеточный рак легкого) регулярное измерение концентрации нейронспецифической енолазы позволяет оценивать ответ опухоли на химиотерапию. Снижение уровня маркера говорит о положительной динамике.
• Выявление рецидивов. После завершения лечения рост уровня НСЕ может стать первым признаком возвращения болезни, часто еще до появления клинических симптомов.
• Диагностика и прогноз при нейробластоме. Это исследование широко применяется в детской онкологии для диагностики и определения прогноза этого вида опухоли.
• Оценка степени повреждения головного мозга. В неврологии и реаниматологии анализ может использоваться для оценки тяжести и прогноза при черепно-мозговых травмах, ишемических инсультах и гипоксическом поражении мозга.

Факторы, влияющие на точность определения НСЕ

Существуют факторы, которые могут привести к получению ложноположительного или ложноотрицательного результата анализа на нейронспецифическую енолазу. Знание этих факторов важно как для пациента, так и для медицинского персонала, чтобы обеспечить максимальную достоверность исследования.

Ключевым фактором, искажающим результат, является гемолиз — разрушение эритроцитов (красных кровяных телец) в образце крови. Эритроциты также содержат енолазу, хотя и другого типа, но она может вступать в перекрестную реакцию с реагентами, что приводит к ложному завышению показателей НСЕ. Гемолиз может произойти из-за неправильной техники взятия крови, чрезмерного встряхивания пробирки или нарушения условий хранения и транспортировки образца.

Другие возможные причины искажения результатов:

• Прием некоторых лекарственных препаратов.
• Несоблюдение пациентом правил подготовки к анализу (например, прием пищи перед сдачей крови).
• Неправильное хранение образца сыворотки крови (например, многократное замораживание и оттаивание).

Поэтому для получения надежного результата крайне важно обращаться в проверенные лаборатории, где строго соблюдаются все этапы преаналитической подготовки и самого анализа.

Список литературы

1. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. / под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. — Т. 1. — 928 с.
2. Онкология: национальное руководство / под ред. В. И. Чиссова, М. И. Давыдова. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2013. — 576 с.
3. Злокачественные новообразования легкого и плевры. Клинические рекомендации / Ассоциация онкологов России, Российское общество клинической онкологии. — М., 2021.
4. Tietz Textbook of Clinical Chemistry and Molecular Diagnostics / Edited by Nader Rifai. — 6th ed. — St. Louis, Missouri: Elsevier, 2018. — 2000 p.
5. Small-Cell Lung Cancer: ESMO Clinical Practice Guidelines for diagnosis, treatment and follow-up / J. Vansteenkiste, F. De Ruysscher, W. E. E. Eberhardt, et al. // Annals of Oncology. — 2021. — Vol. 32(7). — P. 844-858.