Лабораторные тесты на ГИТ: понимание результатов анализов ELISA и SRA

Понимание результатов лабораторных тестов на гепарин-индуцированную тромбоцитопению (ГИТ) является ключевым моментом в диагностике этого серьезного состояния. Когда врач подозревает ГИТ, обычно назначаются два основных вида анализов: иммуноферментный анализ (ИФА, или ELISA) и функциональный тест, такой как анализ высвобождения серотонина (АТС, или SRA). Эти исследования помогают выявить специфические антитела, вызывающие опасную реакцию организма на гепарин. Правильная и своевременная интерпретация результатов этих тестов напрямую влияет на дальнейшую тактику лечения и позволяет избежать жизнеугрожающих осложнений.

Что такое гепарин-индуцированная тромбоцитопения и почему важна точная диагностика

Гепарин-индуцированная тромбоцитопения — это иммунная реакция организма на введение гепарина, препарата, который широко используется для предотвращения и лечения тромбозов. Парадокс этого состояния заключается в том, что лекарство, предназначенное для разжижения крови, запускает механизм, ведущий к образованию новых, опасных тромбов. Это происходит из-за выработки антител к комплексу «гепарин – тромбоцитарный фактор 4». Эти антитела активируют тромбоциты — клетки крови, отвечающие за свертывание, — что приводит к их резкому снижению (тромбоцитопении) и одновременно к повышенному риску тромбозов артерий и вен.

Важность точной и быстрой диагностики ГИТ невозможно переоценить. Без своевременного прекращения введения гепарина и назначения альтернативных антикоагулянтов, риск тяжелых осложнений, таких как тромбоэмболия легочной артерии, инфаркт миокарда, инсульт или гангрена конечностей, чрезвычайно высок. Именно поэтому лабораторные тесты играют решающую роль, позволяя подтвердить или исключить диагноз.

Два ключевых анализа: иммуноферментный (ELISA) и функциональный (SRA) тесты

Для диагностики гепарин-индуцированной тромбоцитопении используются два принципиально разных типа лабораторных исследований. Они не взаимозаменяемы, а дополняют друг друга, предоставляя врачу полную картину.

• Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA) — это скрининговый, или отсеивающий, тест. Он определяет само наличие в крови антител, которые способны связываться с комплексом «гепарин – тромбоцитарный фактор 4». Этот тест обладает высокой чувствительностью.
• Анализ высвобождения серотонина (АТС, SRA) — это функциональный, или подтверждающий, тест. Он проверяет, способны ли обнаруженные антитела на самом деле активировать тромбоциты. Этот анализ считается «золотым стандартом» диагностики, так как обладает высокой специфичностью.

Разница между ними подобна опознанию подозреваемого: ИФА (ELISA) показывает, что в крови есть «подозреваемый» (антитело), а АТС (SRA) доказывает, что этот «подозреваемый» действительно совершает «преступление» (активирует тромбоциты).

Иммуноферментный анализ (ИФА, ELISA): первый шаг в диагностике ГИТ

Иммуноферментный анализ — это первый и наиболее доступный тест, который проводится при подозрении на ГИТ. Его главная задача — быстро и с высокой вероятностью исключить диагноз.

Принцип работы: В лабораторных условиях создается среда с комплексами «гепарин – тромбоцитарный фактор 4». В эту среду добавляют плазму крови пациента. Если в крови есть искомые антитела, они связываются с этими комплексами. Специальный фермент, добавленный в систему, вызывает окрашивание, интенсивность которого измеряется прибором. Результат обычно выражается в единицах оптической плотности (ОП, или OD).

Как интерпретировать результат:

• Отрицательный результат ИФА. Благодаря высокой чувствительности теста (более 95%), отрицательный результат с большой долей вероятности позволяет исключить диагноз гепарин-индуцированной тромбоцитопении. Если клиническая картина не является абсолютно типичной, врач может с уверенностью прекратить дальнейший диагностический поиск в этом направлении.
• Положительный результат ИФА. Этот результат требует более внимательного анализа. Положительный тест означает лишь то, что в крови обнаружены антитела. Однако не все эти антитела способны вызывать активацию тромбоцитов и приводить к развитию болезни. Такой результат может быть ложноположительным. Поэтому положительный результат ИФА не является окончательным подтверждением диагноза и требует проведения функционального теста.

Многих пациентов беспокоит, что означает положительный результат ELISA, если симптомов нет. Важно понимать, что антитела могут присутствовать в крови, но не быть патогенными, то есть не вызывать болезнь. Именно для различения этих ситуаций и нужен следующий, более точный анализ.

Анализ высвобождения серотонина (АТС, SRA): золотой стандарт подтверждения диагноза

Анализ высвобождения серотонина является подтверждающим тестом. Его назначают, как правило, после получения положительного результата иммуноферментного анализа для окончательной верификации диагноза ГИТ.

Принцип работы: Этот тест намного сложнее в исполнении. В лаборатории используются тромбоциты здоровых доноров, которые предварительно метятся радиоактивным серотонином. Затем к этим тромбоцитам добавляют сыворотку крови пациента в присутствии низких и высоких концентраций гепарина. Если в сыворотке пациента содержатся «агрессивные» антитела к ГИТ, они активируют донорские тромбоциты в присутствии низкой концентрации гепарина, что приводит к высвобождению из них радиоактивного серотонина. При высокой концентрации гепарина эта реакция подавляется.

Как интерпретировать результат:

• Положительный результат АТС. Высвобождение значительного количества серотонина, которое блокируется высокой дозой гепарина, подтверждает, что антитела в крови пациента являются функционально активными. Такой результат с высокой специфичностью (более 95%) подтверждает диагноз гепарин-индуцированной тромбоцитопении.
• Отрицательный результат АТС. Если высвобождения серотонина не происходит, это означает, что антитела, обнаруженные с помощью ИФА, не являются патогенными. В этом случае диагноз ГИТ считается маловероятным.

Из-за технической сложности, высокой стоимости и необходимости работы с радиоактивными изотопами, анализ высвобождения серотонина выполняется не во всех лабораториях, и время получения результата может быть дольше, чем у ИФА.

Как интерпретировать результаты анализов в комплексе: пошаговый алгоритм

Диагноз гепарин-индуцированной тромбоцитопении никогда не ставится на основании одного лишь анализа. Врач всегда сопоставляет лабораторные данные с клинической картиной. Для удобства понимания, представим возможные комбинации результатов в виде таблицы.

Что происходит до и после получения результатов анализов на ГИТ

Ключевой аспект ведения пациентов с подозрением на гепарин-индуцированную тромбоцитопению — это то, что лечебные мероприятия начинаются еще до получения лабораторного подтверждения. Ожидание результатов, особенно функционального теста, может занять несколько дней, а промедление в этой ситуации опасно.

При высоком клиническом подозрении на ГИТ (на основе специальных шкал, например, шкалы 4Т) врач принимает решение немедленно:

1. Прекратить введение всех форм гепарина (включая низкомолекулярные гепарины и промывание катетеров гепариновым раствором).
2. Назначить альтернативный антикоагулянт, который не вызывает эту реакцию.
3. Взять кровь для проведения лабораторных тестов (ИФА и/или АТС).

Результаты анализов приходят уже на фоне измененной терапии. Они служат для подтверждения или опровержения первоначального диагноза и определения дальнейшей долгосрочной стратегии. Если диагноз ГИТ подтвержден, пациенту пожизненно противопоказано применение любых форм гепарина, о чем делается соответствующая запись в медицинской документации.

Список литературы

1. Клинические рекомендации «Гепарин-индуцированная тромбоцитопения». Национальное гематологическое общество, Национальное общество детских гематологов и онкологов. – 2021.
2. Руководство по гематологии: в 3 т. / под ред. А. И. Воробьева. – 3-е изд., перераб. и доп. – М.: Ньюдиамед, 2005. – Т. 3. – 416 с.
3. Warkentin T.E. Heparin-induced thrombocytopenia: pathogenesis, diagnosis, and management // Hematology. A publication of the American Society of Hematology. Education Program. – 2011. – Vol. 2011, № 1. – P. 143–149.
4. Cuker A., Gimotty P.A., Crowther M.A., Warkentin T.E. Predictive value of the 4Ts scoring system for heparin-induced thrombocytopenia: a systematic review and meta-analysis // Blood. – 2012. – Vol. 120, № 20. – P. 4160–4167.
5. Linkins L.A., Dans A.L., Moores L.K., et al. Treatment and prevention of heparin-induced thrombocytopenia: Antithrombotic Therapy and Prevention of Thrombosis, 9th ed: American College of Chest Physicians Evidence-Based Clinical Practice Guidelines // Chest. – 2012. – Vol. 141, № 2 Suppl. – P. e495S–e530S.