Процедура забора биоматериала для генетического анализа на непереносимость лактозы

Процедура забора биоматериала для генетического анализа на непереносимость лактозы — это первый и ключевой этап на пути к точной диагностике этого состояния. От того, насколько правильно будет собран материал, напрямую зависит достоверность результата. Генетический тест на лактазную недостаточность позволяет выявить наследственную предрасположенность к снижению активности фермента лактазы, который отвечает за расщепление молочного сахара. Для исследования подходит венозная кровь или клетки слизистой оболочки щеки (буккальный эпителий). Понимание всех этапов процесса, от подготовки до самой манипуляции, поможет вам пройти диагностику спокойно, уверенно и получить надежные данные для дальнейших врачебных рекомендаций.

Виды биоматериала для ДНК-диагностики лактазной недостаточности

Для выделения ДНК и последующего анализа гена LCT, ответственного за синтез лактазы, используются два основных вида биологического материала. Выбор конкретного вида зависит от предпочтений пациента, его возраста и возможностей лаборатории. Важно понимать, что на точность генетического анализа вид биоматериала не влияет — ДНК во всех клетках организма одинакова.

• Венозная кровь. Это классический и наиболее распространенный материал для большинства генетических исследований. Кровь берется из локтевой вены в специальную пробирку с антикоагулянтом (веществом, препятствующим свертыванию), что позволяет сохранить клетки крови в целости для последующего выделения ДНК.
• Буккальный эпителий. Это клетки, полученные путем соскоба с внутренней поверхности щеки. Данный метод является неинвазивным, то есть не требует прокола кожи, и абсолютно безболезнен. Именно поэтому его часто предпочитают для обследования маленьких детей и пациентов, которые боятся уколов. Забор производится стерильной ватной палочкой или специальной щеточкой.

Как правильно подготовиться к сдаче анализа

Правильная подготовка — это залог получения точного результата. Несоблюдение рекомендаций может привести к загрязнению образца или деградации ДНК, что сделает анализ невозможным или приведет к ошибочному заключению. Правила подготовки немного различаются в зависимости от выбранного типа биоматериала.

Подготовка к забору буккального эпителия (соскоба со щеки):

• За 1–2 часа до процедуры необходимо воздержаться от приема пищи, питья (кроме чистой негазированной воды, которую можно пить не позднее чем за 30 минут до сбора), курения и жевания жевательной резинки. Это критически важно, чтобы в образец не попали частицы пищи или чужеродная ДНК, которые могут помешать анализу.
• Непосредственно перед забором материала не следует чистить зубы или использовать ополаскиватель для рта. Гигиенические средства могут содержать компоненты, разрушающие клетки или ингибирующие (подавляющие) реакцию в лаборатории.
• Грудным детям рекомендуется проводить забор материала не ранее чем через 1 час после кормления. Перед процедурой ребенку можно дать попить немного чистой воды.

Подготовка к сдаче венозной крови:

• Специальной строгой диеты перед генетическим анализом на лактазную недостаточность не требуется. В отличие от биохимических тестов, концентрация ДНК в крови не зависит от приема пищи.
• Тем не менее, большинство лабораторий рекомендует сдавать кровь натощак (спустя 8–12 часов после последнего приема пищи) или по крайней мере выдержать перерыв в 3–4 часа. Это общая рекомендация для взятия венозной крови, которая помогает избежать хилеза — состояния, при котором сыворотка крови становится мутной из-за большого количества жировых частиц, что может затруднить лабораторную работу.
• За 30 минут до сдачи крови следует исключить физические и эмоциональные нагрузки, а также курение.

Этапы проведения процедуры забора буккального эпителия

Процедура сбора клеток с внутренней поверхности щеки проста, быстра и не вызывает неприятных ощущений. Ее может провести медицинский работник в лаборатории или клинике. Весь процесс занимает всего несколько минут.

1. Пациента просят прополоскать рот чистой водой, если это не было сделано заранее, для удаления излишков слюны и остатков пищи.
2. Медицинский работник вскрывает стерильную упаковку со специальным зондом-щеточкой или ватной палочкой.
3. С легким нажимом специалист проводит зондом по внутренней поверхности одной, а затем другой щеки несколько раз (обычно 10–15 вращательных движений с каждой стороны). Цель — собрать достаточное количество клеток эпителия. Эта манипуляция абсолютно безболезненна и не вызывает дискомфорта.
4. После сбора материала рабочий конец зонда помещается в стерильную пробирку, которая герметично закрывается и маркируется. Иногда кончик палочки с материалом отламывается или отрезается и остается в пробирке.

Особенности взятия венозной крови для генетического теста

Взятие венозной крови — это стандартная медицинская манипуляция, которая проводится квалифицированным персоналом. Несмотря на свою рутинность, она требует соблюдения строгих правил асептики и антисептики для безопасности пациента.

1. Пациент садится в кресло, освобождая руку от одежды до локтя. Под локоть подкладывается специальная подушечка.
2. На среднюю треть плеча накладывается жгут, чтобы усилить наполнение вен кровью. Пациента просят несколько раз сжать и разжать кулак.
3. Медсестра обрабатывает кожу в области локтевого сгиба антисептиком.
4. Производится венепункция (прокол вены) стерильной иглой, и кровь самотеком поступает в вакуумную пробирку с антикоагулянтом (чаще всего ЭДТА). Для генетического анализа обычно требуется от 2 до 5 мл крови.
5. После набора необходимого объема крови игла извлекается, а к месту прокола прижимается стерильная салфетка. Пациента просят согнуть руку в локте и подержать ее в таком положении несколько минут для предотвращения образования гематомы (синяка).

Пациент может ощущать лишь легкий дискомфорт в момент введения иглы, который проходит сразу после завершения процедуры.

Сбор биоматериала у детей: что нужно знать родителям

Диагностика лактазной недостаточности часто проводится в раннем возрасте. Для детей, особенно для младенцев, неинвазивный метод сбора буккального эпителия является методом выбора. Это позволяет избежать стресса, связанного с уколом, как для ребенка, так и для родителей.

• Выбор времени. Проводите забор материала между кормлениями, когда ребенок спокоен. Идеально — через 1–1,5 часа после еды.
• Подготовка. Перед процедурой дайте малышу попить немного чистой воды из бутылочки или с ложечки, чтобы очистить полость рта.
• Процесс. Во время сбора материала лучше всего держать ребенка на руках, в привычном и удобном для него положении. Аккуратно, но достаточно интенсивно проведите стерильной палочкой по внутренней стороне щечек.
• Психологический комфорт. Важно, чтобы родитель был спокоен. Ваше спокойствие передастся ребенку, и процедура пройдет легко. Манипуляция не причиняет боли, и ребенок, скорее всего, воспримет ее как игру.

Факторы, влияющие на достоверность результата анализа

Для вашего удобства мы свели ключевые моменты, от которых зависит качество биоматериала и, как следствие, точность генетического анализа, в одну таблицу. Соблюдение этих простых правил поможет избежать необходимости повторной сдачи теста.

Список литературы

1. Национальная программа оптимизации вскармливания детей первого года жизни в Российской Федерации / Союз педиатров России. — М.: ПедиатрЪ, 2019. — 368 с.
2. Бочков Н. П. Клиническая генетика: Учебник. — 4-е изд., доп. и перераб. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. — 592 с.
3. Шабалов Н. П. Детские болезни: Учебник для вузов. В 2 томах. 9-е изд. — СПб.: Питер, 2021. — 928 с.
4. Гастроэнтерология и гепатология: Клиническое руководство / под ред. К. Дж. Хоки, Х. А. Босха и др.