Процедура сбора ДНК-образцов: пошаговое руководство для дома и клиники

Процедура сбора ДНК-образцов — это фундаментальный и самый первый этап любого генетического исследования. От того, насколько правильно был собран, сохранен и доставлен в лабораторию биологический материал, напрямую зависит точность и достоверность результата анализа. Ошибки на этом этапе могут привести к необходимости повторного сбора, что затягивает время диагностики и добавляет лишних волнений. Важно понимать, что сам процесс, будь то в домашних условиях или в медицинском учреждении, является стандартизированным и безопасным. Следование простым правилам гарантирует получение качественного образца, пригодного для дальнейшего анализа дезоксирибонуклеиновой кислоты.

Виды биологического материала для анализа ДНК

Для выделения дезоксирибонуклеиновой кислоты можно использовать практически любые клетки организма, содержащие ядро. Однако в клинической практике для генетических тестов применяют определенные типы биоматериала, которые обеспечивают высокое качество и достаточное количество ДНК, а также легкость и безопасность сбора. Выбор конкретного типа образца зависит от вида исследования, возраста пациента и требований лаборатории.

Ниже представлена сравнительная таблица основных видов биоматериала, используемых для генетических исследований.

Подготовка к сбору образцов дезоксирибонуклеиновой кислоты: общие правила

Правильная подготовка — ключ к получению чистого, не загрязненного посторонними примесями образца. Загрязнение образца ДНК пищей, напитками или бактериями из ротовой полости может сделать анализ невозможным. Независимо от того, какой тип материала вы собираете (слюну или буккальный мазок), существуют общие рекомендации, которых необходимо придерживаться.

Вот основные шаги, которые нужно выполнить перед процедурой:

• Воздержание от еды и напитков. За 30–60 минут до сбора образца необходимо полностью исключить прием пищи, воды, соков, чая, кофе и других напитков. Частицы пищи и сахара могут помешать лабораторным реакциям.
• Отказ от курения и жевательной резинки. Минимум за 30–60 минут до процедуры следует воздержаться от курения (включая электронные сигареты) и использования жевательной резинки. Эти вещества изменяют химический состав слюны и могут ингибировать (подавлять) процессы анализа ДНК.
• Гигиена полости рта. Не следует чистить зубы или использовать ополаскиватель для рта за 30–60 минут до сбора, так как компоненты зубной пасты могут повлиять на результат. Достаточно прополоскать рот чистой питьевой водой за 10–15 минут до процедуры и дождаться, пока слизистая вернется в естественное состояние.
• Губная помада. Женщинам рекомендуется удалить губную помаду или блеск для губ, чтобы их частицы случайно не попали в образец слюны или на щеточку для мазка.

Эти правила не применяются при сдаче венозной крови, так как на состав ДНК в лейкоцитах крови прием пищи не влияет. Однако для некоторых комплексных анализов могут быть даны особые рекомендации, которые следует уточнить заранее.

Сбор ДНК в домашних условиях: пошаговая инструкция

Большинство современных генетических лабораторий предлагают наборы для самостоятельного сбора биоматериала на дому. Это удобно, конфиденциально и абсолютно безопасно при соблюдении инструкции. Чаще всего для домашнего сбора используется буккальный эпителий или слюна.

Метод 1: Буккальный мазок (соскоб со щеки)

Это самый распространенный и простой метод. В наборе вы найдете стерильные щеточки (зонды) в индивидуальной упаковке и пробирку для их транспортировки.

1. Подготовка. Вымойте руки с мылом. Подготовьте набор и внимательно прочитайте инструкцию, приложенную производителем.
2. Извлечение зонда. Аккуратно вскройте стерильную упаковку со стороны ручки, не касаясь мягкого наконечника.
3. Сбор материала. Введите зонд в ротовую полость. С умеренным нажимом проведите наконечником по внутренней поверхности одной щеки 10–15 раз, прокручивая зонд. Цель — собрать клетки эпителия, а не просто смочить наконечник слюной. Повторите процедуру для второй щеки, используя тот же зонд (если иное не указано в инструкции).
4. Высушивание. После сбора материала зонд необходимо подсушить на воздухе в течение 5–15 минут. Не кладите его на поверхности и не допускайте контакта с чем-либо. Это предотвращает рост бактерий и разрушение ДНК.
5. Упаковка. Поместите высушенный зонд в специальную пробирку или конверт из набора. Плотно закройте. Подпишите образец в соответствии с требованиями (Ф. И. О., дата рождения).

Метод 2: Сбор слюны

Этот метод еще проще, но требует способности сгенерировать достаточный объем слюны.

1. Подготовка. Перед сбором можно слегка помассировать щеки для стимуляции слюнных желез.
2. Сбор. Аккуратно сплюньте слюну в специальную воронку, соединенную с пробиркой. Необходимо набрать объем до указанной отметки, не считая пены.
3. Добавление консерванта. После сбора слюны воронку отсоединяют, а на пробирку накручивают крышку, содержащую специальный консервирующий раствор. Он автоматически смешивается со слюной.
4. Перемешивание. Плотно закрытую пробирку необходимо несколько раз аккуратно перевернуть для полного смешивания слюны с консервантом. Не трясите слишком сильно.
5. Маркировка. Подпишите пробирку, как указано в инструкции.

Как происходит забор материала в клинике

Сбор биологического материала в условиях медицинского учреждения проводится квалифицированным персоналом и чаще всего подразумевает взятие венозной крови. Этот метод является предпочтительным для многих сложных диагностических тестов, так как обеспечивает получение большого количества высококачественной дезоксирибонуклеиновой кислоты.

Процедура забора венозной крови стандартна и безопасна. Она проходит в несколько этапов:

1. Подготовка. Пациент садится в кресло. Медсестра обрабатывает область локтевого сгиба антисептиком. Выше места прокола накладывается жгут для улучшения наполнения вены кровью.
2. Пункция вены. С помощью стерильной иглы, соединенной со специальной вакуумной пробиркой (вакутейнером), выполняется прокол вены. Кровь под действием вакуума сама поступает в пробирку.
3. Завершение. После набора необходимого количества крови игла извлекается, а к месту прокола прижимается стерильная салфетка. Накладывается давящая повязка, которую можно снять через 15–20 минут.

Весь процесс занимает всего несколько минут. Используемые пробирки содержат антикоагулянт (например, ЭДТА), который предотвращает свертывание крови и сохраняет клетки целыми, что критически важно для последующего выделения ДНК.

Особенности сбора ДНК-образцов у детей и младенцев

Сбор биоматериала у самых маленьких пациентов имеет свои нюансы и требует особого подхода. Главная задача — сделать процедуру максимально быстрой, безболезненной и минимально стрессовой как для ребенка, так и для родителей.

• Для младенцев и детей до 3 лет оптимальным методом является буккальный мазок. Собрать слюну в пробирку у них практически невозможно.
• Правильное время. Процедуру лучше проводить через час после кормления, чтобы избежать срыгивания и попадания молока в образец. Ребенок должен быть спокоен.
• Техника сбора мазка. Для сбора образца у младенца лучше использовать специальный детский зонд меньшего размера. Аккуратно введите зонд между десной и щекой и совершите несколько вращательных движений. Можно слегка отвлечь ребенка игрушкой. Важно действовать уверенно, но нежно.
• Психологическая подготовка. С детьми постарше можно провести процедуру в игровой форме, объяснив, что нужно «почистить щечку изнутри волшебной палочкой». Спокойствие родителей передается ребенку, поэтому важно сохранять позитивный настрой.
• Забор крови. Если необходим анализ венозной крови, его проводят опытные детские медсестры, которые умеют быстро и почти безболезненно находить вены у малышей.

Хранение и транспортировка образца: как сохранить качество ДНК

После того как образец ДНК собран, его необходимо правильно сохранить и как можно скорее доставить в лабораторию. Молекула дезоксирибонуклеиновой кислоты достаточно стабильна, но неправильные условия могут привести к ее разрушению (деградации) или росту бактерий, что сделает анализ невозможным.

Основные правила хранения и транспортировки:

• Температурный режим. Образцы венозной крови обычно хранят и транспортируют при температуре от +2 до +8 °C (в холодильнике, но не в морозильной камере). Замораживание цельной крови разрушает клетки. Буккальные мазки и слюна в консерванте, как правило, могут храниться при комнатной температуре в течение нескольких недель, но точные условия всегда указаны в инструкции к набору.
• Сроки. Чем быстрее образец попадет в лабораторию, тем лучше. Для венозной крови желательно доставить ее в течение 24–48 часов. Для слюны и мазков сроки могут быть больше, до нескольких недель.
• Упаковка. Образец должен быть герметично закрыт и помещен в дополнительную упаковку (например, зип-пакет) для защиты от протекания и внешних загрязнений. Если вы отправляете образец курьерской службой, убедитесь, что упаковка соответствует их требованиям для перевозки биологических материалов.
• Избегайте перепадов температур. Не оставляйте образцы под прямыми солнечными лучами, возле отопительных приборов или в автомобиле на жаре.

Соблюдение этих несложных инструкций на каждом этапе — от подготовки до транспортировки — является залогом того, что ваше генетическое исследование будет выполнено качественно и с первого раза, предоставив точную информацию, необходимую для диагностики или планирования.

Список литературы

1. Гинтер Е. К. Медицинская генетика: Учебник. — М.: Медицина, 2003. — 448 с.
2. Бочков Н. П. Клиническая генетика: Учебник. — 4-е изд., доп. и перераб. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011. — 592 с.
3. ГОСТ Р 53079.4-2008. Технологии лабораторные клинические. Обеспечение качества клинических лабораторных исследований. Часть 4. Правила ведения преаналитического этапа. — М.: Стандартинформ, 2009.
4. Клиническая лабораторная диагностика: национальное руководство: в 2 т. / под ред. В. В. Долгова, В. В. Меньшикова. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2012. — Т. 1. — 928 с.
5. Nussbaum R. L., McInnes R. R., Willard H. F. Thompson & Thompson Genetics in Medicine. 8th ed. — Philadelphia: Elsevier, 2016. — 546 p.