Диагностика болезни Фабри: анализ активности фермента альфа-галактозидазы А

Основным методом подтверждения диагноза болезни Фабри у мужчин является анализ активности фермента альфа-галактозидазы А. Это биохимическое исследование позволяет измерить, насколько хорошо работает ключевой фермент, дефицит которого и вызывает развитие этого редкого генетического заболевания. Своевременная и точная диагностика — первый и самый важный шаг на пути к контролю над болезнью и предотвращению ее тяжелых осложнений, затрагивающих почки, сердце и нервную систему.

Что такое болезнь Фабри и почему важен анализ на альфа-галактозидазу А

Болезнь Фабри — это наследственное (орфанное) заболевание из группы лизосомных болезней накопления. Его причина кроется в мутации гена GLA, расположенного на X-хромосоме. Этот ген отвечает за выработку фермента под названием альфа-галактозидаза А (сокращенно α-Gal A). В норме α-Gal A расщепляет в клетках организма сложное жироподобное вещество — глоботриаозилкерамид (Gb3).

При болезни Фабри активность этого фермента значительно снижена или полностью отсутствует. В результате Gb3 не расщепляется, а накапливается внутри клеточных структур, называемых лизосомами. Этот процесс происходит во многих типах клеток по всему организму, но особенно страдают стенки сосудов, нервные клетки, клетки сердца и почек. Постепенное накопление Gb3 нарушает их нормальную работу и со временем приводит к серьезным повреждениям органов. Анализ активности фермента альфа-галактозидазы А напрямую измеряет корень проблемы — функциональную недостаточность этого энзима. Это позволяет не просто предположить, а с высокой точностью подтвердить диагноз.

Кому и в каких случаях назначают измерение активности фермента

Измерение активности фермента α-Gal A является ключевым скрининговым и диагностическим тестом. Его назначают при наличии у пациента характерного набора симптомов или при отягощенной семейной истории. Важно понимать, что проявления болезни Фабри могут быть очень разнообразными и часто маскируются под другие, более распространенные заболевания.

Вот основные ситуации, в которых специалист может порекомендовать пройти это исследование:

• Неврологические симптомы: Появление жгучих, стреляющих болей в кистях и стопах (акропарестезии), особенно у детей и подростков. Снижение потоотделения (гипогидроз) и, как следствие, плохая переносимость жары и физических нагрузок.
• Дерматологические проявления: Наличие на коже ангиокером — мелких, безболезненных высыпаний темно-красного или фиолетового цвета, которые чаще всего располагаются на бедрах, ягодицах, в области пупка.
• Офтальмологические признаки: Обнаружение при осмотре у офтальмолога специфического помутнения роговицы (cornea verticillata), которое не влияет на зрение, но является важным диагностическим маркером.
• Поражение почек: Появление белка в моче (протеинурия), постепенное снижение функции почек, развитие хронической почечной недостаточности в молодом или среднем возрасте без очевидных причин (таких как диабет или гипертония).
• Кардиологические проблемы: Утолщение стенок левого желудочка сердца (гипертрофия миокарда), нарушения сердечного ритма, боли в сердце неясного происхождения.
• Семейный анамнез: Если у кого-то из кровных родственников (особенно по материнской линии) была диагностирована болезнь Фабри, обследование рекомендуется пройти всем членам семьи, которые могут быть носителями мутации.

Как проводится анализ на активность альфа-галактозидазы А: этапы и подготовка

Процедура анализа для пациента предельно проста и безопасна. В большинстве современных лабораторий исследование проводится методом сухих пятен крови. Это значит, что для анализа не требуется брать кровь из вены. Достаточно нескольких капель капиллярной крови, полученных из пальца, которые наносятся на специальную фильтровальную бумагу и высушиваются. Этот метод удобен, малотравматичен и позволяет легко транспортировать биоматериал в лабораторию.

В некоторых случаях для исследования может использоваться венозная кровь, из которой выделяют плазму или лейкоциты. Выбор биоматериала зависит от методики, используемой в конкретной лаборатории.

Этапы проведения анализа:

1. Забор биоматериала: У пациента берут несколько капель крови из пальца или кровь из вены.
2. Лабораторный этап: В лаборатории образец обрабатывают специальным веществом (субстратом), которое в норме расщепляется ферментом альфа-галактозидаза А. По скорости и интенсивности реакции (например, по изменению цвета или флуоресценции) определяют, насколько активен фермент в образце пациента.
3. Получение результата: Результат выдается в виде числового значения, которое сравнивается с референсными (нормальными) показателями для данной лаборатории.

Специальной подготовки для сдачи анализа на активность фермента α-Gal A обычно не требуется. Нет необходимости приходить натощак или соблюдать диету. Тем не менее, перед процедурой всегда следует уточнить требования конкретной лаборатории и проинформировать врача обо всех принимаемых лекарственных препаратах.

Интерпретация результатов: что означают показатели активности фермента

Трактовка результатов анализа на активность альфа-галактозидазы А имеет ключевые различия для мужчин и женщин из-за особенностей наследования заболевания (сцепленного с X-хромосомой). Понимание этих различий критически важно для постановки верного диагноза.

Для наглядности приведем основные принципы интерпретации в виде таблицы:

Таким образом, для мужчин измерение активности фермента является высокоточным и надежным диагностическим методом. Если мужчина болен, его фермент практически не работает. У женщин ситуация сложнее, и нормальные показатели активности энзима не могут быть основанием для снятия подозрений на болезнь.

Особенности диагностики у женщин: почему ферментный анализ не всегда информативен

Главная сложность диагностики болезни Фабри у женщин связана с биологическим процессом, который называется лионизация или инактивация X-хромосомы. У женщин в каждой клетке есть две X-хромосомы: одна унаследована от матери, другая — от отца. На ранних этапах развития в каждой клетке одна из этих двух хромосом случайным образом «выключается» (инактивируется).

Если женщина является носительницей мутации в гене GLA, расположенном на одной из X-хромосом, то в ее организме будет присутствовать мозаика из двух типов клеток:

• Клетки, в которых инактивирована здоровая X-хромосома. В них будет работать только X-хромосома с мутантным геном, и фермент альфа-галактозидаза А производиться не будет.
• Клетки, в которых инактивирована X-хромосома с мутацией. В них будет работать здоровая X-хромосома, которая обеспечит нормальную выработку фермента.

Соотношение этих клеток в организме абсолютно случайно. Если у женщины-носительницы «выключилось» больше дефектных хромосом, общая активность фермента α-Gal A в крови может быть в пределах нормы или лишь незначительно снижена. При этом накопление Gb3 все равно будет происходить в тех тканях, где преобладают клетки с неработающим геном, что приведет к развитию симптомов болезни. Именно поэтому до 30–50% женщин с генетически подтвержденной болезнью Фабри имеют нормальные показатели активности фермента. Следовательно, для всех женщин с клиническим подозрением на это заболевание «золотым стандартом» диагностики является не ферментный анализ, а прямое секвенирование гена GLA для поиска мутации.

Что делать после получения результатов анализа

Получение результатов — это не конечная точка, а начало важного пути. План действий напрямую зависит от полученных данных и клинической картины.

При подтверждении диагноза (низкая активность фермента у мужчины или обнаружение мутации у женщины):

Первоочередная задача — обратиться к специалисту, имеющему опыт ведения пациентов с болезнью Фабри. Обычно это врач-нефролог, кардиолог или генетик. Будет разработан план комплексного обследования для оценки степени поражения внутренних органов (почек, сердца, нервной системы). На основе этих данных решается вопрос о начале патогенетического лечения — ферментной заместительной терапии (ФЗТ), которая помогает восполнить дефицит альфа-галактозидазы А и остановить прогрессирование болезни.

При нормальной активности фермента у женщины (при сохранении подозрений):

Необходимо в обязательном порядке провести молекулярно-генетическое исследование гена GLA. Только этот анализ может окончательно подтвердить или опровергнуть диагноз у женщин.

Семейный скрининг:

Поскольку болезнь Фабри — наследственное заболевание, при подтверждении диагноза у одного члена семьи крайне важно проинформировать родственников (особенно по материнской линии) о необходимости пройти обследование. Раннее выявление болезни у братьев, сестер, детей, тётей, дядей и двоюродных родственников позволяет начать лечение до развития необратимых осложнений.

Список литературы

1. Клинические рекомендации «Болезнь Фабри». Разработчик: Ассоциация медицинских генетиков. — Москва, 2020.
2. Germain D.P., et al. Fabry disease: recent advances in enzyme replacement therapy and chaperone therapy // Journal of Medical Genetics. — 2019. — Vol. 56(1). — P. 1—9.
3. Моисеев С.В., Фомин В.В., Мухин Н.А. Болезнь Фабри: от симптомов к диагнозу и лечению // Клиническая фармакология и терапия. — 2015. — Т. 24, № 1. — С. 78—85.
4. Ortiz A., et al. Fabry disease revisited: Management and treatment recommendations for adult patients // Molecular Genetics and Metabolism. — 2018. — Vol. 123(4). — P. 416—427.
5. Hopkin R.J., et al. Characterization of Fabry disease in 352 pediatric patients in the Fabry Registry // Pediatric Research. — 2008. — Vol. 64(5). — P. 550—555.