Культуральное исследование на грибы: точное определение вида возбудителя

Культуральное исследование на грибы — это основной и наиболее точный метод лабораторной диагностики, позволяющий не только подтвердить наличие грибковой инфекции (микоза), но и с высокой достоверностью определить конкретный вид гриба-возбудителя. Этот анализ заключается в посеве биологического материала пациента на специальные питательные среды с последующим выращиванием и идентификацией грибковых колоний. Именно результаты культурального метода дают врачу ключевую информацию для выбора наиболее эффективного противогрибкового препарата.

Что такое культуральный метод и почему он считается золотым стандартом

Культуральный метод, или посев, — это процесс выращивания микроорганизмов в лабораторных условиях. В контексте микологии это означает, что взятый у пациента образец (например, частичку кожи, ногтя или мазок) помещают в чашку Петри со специальной питательной средой, благоприятной для роста грибов. Чаще всего используется агар Сабуро. Затем чашку помещают в термостат, где поддерживается оптимальная для грибов температура и влажность. Если в образце присутствуют жизнеспособные грибковые клетки, они начинают размножаться и через некоторое время образуют видимые колонии.

Этот метод называют «золотым стандартом» по нескольким причинам:

• Точная идентификация. В отличие от микроскопии, которая лишь показывает наличие грибковых элементов (спор или мицелия), посев позволяет вырастить культуру и точно определить род и вид возбудителя (например, Candida albicans, Trichophyton rubrum или Aspergillus fumigatus).
• Определение чувствительности. Только на выращенной культуре гриба можно провести дополнительный тест — определение чувствительности к антимикотикам. Это исследование показывает, какие именно противогрибковые препараты будут эффективно подавлять рост возбудителя, а какие окажутся бесполезными. Это критически важно при лечении хронических или устойчивых к терапии инфекций.
• Оценка жизнеспособности. Метод подтверждает, что в материале присутствуют именно живые, способные к размножению грибы, а не их остатки, что указывает на активный инфекционный процесс.

Когда назначают посев на грибы

Направление на микологическое культуральное исследование врач может выдать при подозрении на грибковую инфекцию любой локализации. Этот анализ необходим для подтверждения диагноза и подбора целенаправленной терапии. Основные показания к проведению анализа можно сгруппировать следующим образом:

• Поражения кожи: при наличии шелушения, покраснения, зуда, мокнущих участков или пятен, которые не поддаются стандартному лечению. Особенно это актуально для стоп, ладоней, крупных складок кожи и волосистой части головы.
• Изменения ногтевых пластин: утолщение, изменение цвета (пожелтение, потемнение), ломкость, отслоение ногтя от ногтевого ложа.
• Поражения слизистых оболочек: белый творожистый налет во рту (молочница), зуд и выделения из половых органов, длительный насморк или заложенность носа с густыми выделениями.
• Заболевания дыхательных путей: при подозрении на грибковую пневмонию или аспергиллез, особенно у пациентов со сниженным иммунитетом. В этом случае исследуется мокрота.
• Системные микозы: при подозрении на распространение грибковой инфекции по всему организму с током крови (фунгемия). Это тяжелое состояние, требующее немедленной и точной диагностики.
• Контроль эффективности лечения: повторный посев может быть назначен после курса терапии, чтобы убедиться в полном уничтожении возбудителя.

Какие материалы исследуют на наличие грибковой инфекции

Выбор биологического материала для культурального исследования напрямую зависит от предполагаемого места локализации инфекции. Правильный сбор материала является ключевым фактором для получения достоверного результата. Ниже представлена таблица с основными видами биоматериала и соответствующими им локализациями поражения.

Как проходит процедура: от взятия материала до результата

Процесс культуральной диагностики грибковых инфекций состоит из нескольких последовательных этапов. Понимание этих шагов помогает пациентам осознать, почему результат анализа не может быть готов на следующий день и требует терпеливого ожидания.

1. Взятие биоматериала. Эту манипуляцию проводит врач или медицинская сестра в стерильных условиях. Например, при подозрении на грибок кожи стерильным скальпелем аккуратно соскабливают чешуйки с края очага поражения. При онихомикозе (грибке ногтей) срезают или соскабливают пораженную часть ногтевой пластины. Процедура обычно безболезненна и занимает всего несколько минут.

2. Посев на питательную среду. Полученный материал помещают в чашку Петри или пробирку с питательной средой. Лаборант распределяет его по поверхности среды, чтобы обеспечить грибам доступ к питательным веществам.

3. Инкубация. Емкость с посевом помещают в специальный аппарат — термостат, где поддерживается постоянная температура (обычно 25–30 °C). Этот этап самый длительный. Такая продолжительность обусловлена биологическими особенностями грибов, которые растут значительно медленнее, чем, например, бактерии. Рост первых видимых колоний может начаться через 3–7 дней, но для полного результата инкубация продолжается до 3–4 недель.

4. Идентификация возбудителя. Когда колонии вырастают до достаточного размера, миколог оценивает их внешний вид (форму, цвет, текстуру). Затем часть колонии забирают для микроскопического исследования, чтобы изучить структуру мицелия и спор. Совокупность этих признаков позволяет точно определить род и вид гриба.

5. Определение чувствительности к антимикотикам (при необходимости). Если этот тест был назначен, выращенную культуру гриба помещают на среду, содержащую диски с различными противогрибковыми препаратами. По размеру зон, где рост гриба подавлен, определяют, какой препарат наиболее эффективен.

Правильная подготовка к исследованию — залог точного результата

Чтобы результат анализа был достоверным, очень важна правильная подготовка пациента. Несоблюдение рекомендаций может привести к ложноотрицательному результату, когда грибок есть, но в лаборатории он не вырастает. Вот основные правила подготовки:

• Прекратить прием противогрибковых препаратов. Необходимо отменить системные (таблетки, капсулы) антимикотики за 2–4 недели, а местные средства (мази, кремы, лаки, спреи) — за 7–10 дней до сдачи анализа.
• Избегать обработки антисептиками. За 2–3 дня до исследования нельзя обрабатывать пораженные участки кожи или ногтей спиртом, йодом, зеленкой и другими антисептическими растворами.
• Соблюдать гигиену без излишеств. Накануне сдачи анализа с кожи или ногтей можно принять душ с обычным мылом без антибактериальных компонентов. В день анализа мыть пораженный участок не следует.
• Не использовать косметические средства. В день сдачи анализа нельзя наносить на пораженные участки кожи кремы, лосьоны, а на ногти — лечебные или декоративные лаки.
• При сдаче мазков из ротовой полости: анализ сдается натощак, перед этим нельзя чистить зубы, использовать ополаскиватели для рта и жевать жвачку.
• При сдаче материала из половых путей: необходимо воздержаться от половых контактов за 1–2 дня до анализа и не использовать вагинальные свечи или кремы.

Интерпретация результатов культурального исследования

Расшифровку результатов анализа проводит исключительно лечащий врач, который сопоставляет полученные данные с клинической картиной заболевания. Самостоятельная интерпретация может привести к неверным выводам и неправильному лечению.

Положительный результат. Означает, что в исследуемом материале обнаружен рост грибов. В заключении будет указан конкретный род и вид возбудителя (например, Candida albicans), а также его количество (степень обсемененности), которое может быть выражено в колониеобразующих единицах (КОЕ/мл). Если проводилось определение чувствительности, в отчете будет список противогрибковых препаратов с пометками: «S» (чувствителен), «I» (умеренно устойчив), «R» (устойчив).

Отрицательный результат. Означает, что роста грибковой флоры не обнаружено. Однако это не всегда гарантирует отсутствие инфекции. Причинами ложноотрицательного результата могут быть: неправильная подготовка к анализу (использование противогрибковых средств), неправильный забор материала или слишком малое количество грибов в образце. В таких случаях врач может назначить повторное исследование или другие методы диагностики.

Преимущества и недостатки культуральной диагностики

Как и любой метод исследования, посев на грибы имеет свои сильные и слабые стороны. Понимание этих особенностей помогает врачу и пациенту правильно оценивать его диагностическую ценность.

Список литературы

1. Сергеев А.Ю., Сергеев Ю.В. Грибковые инфекции. Руководство для врачей. — М.: БИНОМ-Пресс, 2003. — 440 с.
2. Клинические рекомендации «Дерматофитии». Российское общество дерматовенерологов и косметологов. — М., 2020. — 51 с.
3. Борисов Л.Б. Медицинская микробиология, вирусология, иммунология: Учебник. — М.: Медицинское информационное агентство, 2005. — 736 с.
4. Richardson M.D., Warnock D.W. Fungal Infection: Diagnosis and Management. 4th ed. — Wiley-Blackwell, 2012. — 440 p.
5. Kwon-Chung K.J., Bennett J.E. Medical Mycology. — Lea & Febiger, 1992. — 866 p.