Методы определения ревматоидного фактора: от латекс-теста до ИФА

Определение ревматоидного фактора в сыворотке крови является одним из ключевых лабораторных исследований в диагностике аутоиммунных заболеваний, в первую очередь ревматоидного артрита. Ревматоидный фактор (РФ) — это специфические антитела, которые организм по ошибке вырабатывает против собственных иммуноглобулинов класса G. Наличие этих аутоантител может указывать на системный воспалительный процесс. Существует несколько методов для выявления и измерения РФ, которые различаются по принципу действия, чувствительности и специфичности. Понимание разницы между ними помогает врачу выбрать оптимальный тест и правильно интерпретировать его результаты для постановки точного диагноза.

Что такое ревматоидный фактор и почему его измеряют

Ревматоидный фактор (сокращенно РФ) — это группа аутоантител, то есть белков иммунной системы, которые атакуют собственные ткани организма. Их основной мишенью являются Fc-фрагменты иммуноглобулинов G (IgG). В норме антитела должны бороться с чужеродными агентами, такими как вирусы и бактерии, но при аутоиммунных нарушениях они начинают воспринимать собственные клетки как враждебные. Образующиеся иммунные комплексы «антитело-антитело» откладываются в тканях, преимущественно в синовиальной оболочке суставов, вызывая хроническое воспаление, боль и постепенное разрушение суставного хряща.

Измерение уровня РФ является важной частью диагностики, потому что его присутствие — один из классификационных критериев ревматоидного артрита. Однако важно понимать, что положительный тест на ревматоидный фактор не является стопроцентным подтверждением диагноза, так как он может обнаруживаться и при других состояниях, например, при синдроме Шегрена, системной красной волчанке, некоторых хронических инфекциях (туберкулез, гепатит С) и даже у небольшого процента здоровых людей, особенно в пожилом возрасте. С другой стороны, отрицательный результат не исключает ревматоидный артрит полностью — существует так называемая серонегативная форма заболевания.

Качественные и полуколичественные методы: латекс-тест

Латекс-тест, или реакция латекс-агглютинации, является одним из самых ранних и простых методов для выявления ревматоидного фактора. Этот метод относится к качественным или полуколичественным, то есть он в первую очередь отвечает на вопрос «есть ли РФ в крови?», а не «сколько его?».

Принцип метода довольно прост: на поверхность мельчайших латексных частиц наносят человеческие иммуноглобулины G. Когда сыворотку крови пациента, содержащую РФ, смешивают с этим реагентом, ревматоидный фактор связывается с IgG на частицах. В результате этого взаимодействия латексные частицы «склеиваются» между собой, образуя видимые хлопья. Этот процесс называется агглютинацией. Если РФ в сыворотке нет, агглютинация не происходит, и раствор остается гомогенным.

Результат латекс-теста обычно выражается как «положительный» или «отрицательный». В полуколичественном варианте определяется титр — максимальное разведение сыворотки, при котором еще наблюдается агглютинация (например, 1:80, 1:160). Чем выше титр, тем больше РФ в крови. Несмотря на свою простоту и быстроту, латекс-тест имеет существенные недостатки: относительно низкую чувствительность и специфичность, что может приводить к ложноположительным и ложноотрицательным результатам.

Количественные методы: нефелометрия и турбидиметрия

Нефелометрия и турбидиметрия — это более современные и точные количественные методы, которые позволяют измерить точную концентрацию ревматоидного фактора в крови. Оба метода основаны на измерении того, как свет взаимодействует с иммунными комплексами, образующимися в растворе.

Принцип действия следующий: в пробу сыворотки пациента добавляют реагент, содержащий антигены (в данном случае — IgG). Если в сыворотке присутствует РФ, он связывается с антигенами, образуя иммунные комплексы. Это приводит к помутнению раствора.

• Турбидиметрия измеряет интенсивность света, прошедшего сквозь раствор. Чем больше иммунных комплексов образовалось, тем мутнее раствор и тем меньше света пройдет через него.
• Нефелометрия измеряет интенсивность света, рассеянного частицами в растворе под определенным углом. Этот метод считается более чувствительным, особенно при низких концентрациях вещества.

Главное преимущество этих методов — получение точного количественного результата, который выражается в международных единицах на миллилитр (МЕ/мл). Это позволяет не только диагностировать, но и отслеживать динамику заболевания на фоне лечения. Нефелометрия и турбидиметрия автоматизированы, что снижает риск человеческой ошибки и обеспечивает высокую воспроизводимость результатов.

Иммуноферментный анализ (ИФА) — современный стандарт

Иммуноферментный анализ, известный как ИФА, на сегодняшний день является одним из самых чувствительных и специфичных методов для определения ревматоидного фактора. Он позволяет не только точно измерить общую концентрацию РФ, но и определить его отдельные классы (изотипы): IgM, IgA и IgG.

Суть метода заключается в использовании специальных ферментных меток. На дно лунок лабораторного планшета наносят антиген (иммуноглобулины G). Затем в лунки добавляют сыворотку пациента. Если в ней есть ревматоидный фактор, он связывается с антигеном. После этого добавляют вторичные антитела, меченные ферментом, которые связываются с комплексом «антиген-РФ». На последнем этапе вносится специальный субстрат, который под действием фермента меняет цвет. Интенсивность окраски прямо пропорциональна количеству РФ в образце и измеряется с помощью специального прибора — спектрофотометра.

Возможность определять разные классы РФ имеет большое клиническое значение. РФ класса IgM является наиболее распространенным и определяется большинством тестов. Однако обнаружение РФ классов IgA и IgG может быть связано с более тяжелым течением ревматоидного артрита, системными проявлениями и быстрым разрушением суставов. Таким образом, ИФА предоставляет врачу гораздо больше информации для прогноза и выбора тактики лечения.

Сравнительная таблица методов определения РФ

Для наглядности основные характеристики описанных методов можно представить в виде сравнительной таблицы, которая поможет понять их ключевые различия.

Как правильно подготовиться к сдаче анализа на ревматоидный фактор

Точность лабораторного исследования во многом зависит от правильной подготовки пациента. Хотя анализ на ревматоидный фактор не требует сложной подготовки, соблюдение нескольких простых правил поможет избежать искажения результатов. Вот основные рекомендации:

• Сдавать кровь натощак. Последний прием пищи должен быть за 8–12 часов до взятия крови. Можно пить чистую негазированную воду. Это необходимо, чтобы избежать хилеза — помутнения сыворотки из-за высокого содержания жиров, что может повлиять на оптические свойства пробы.
• Исключить жирную пищу. За день до исследования рекомендуется отказаться от жирной, жареной и острой пищи.
• Воздержаться от алкоголя и курения. Не употребляйте алкоголь за 24 часа до анализа и не курите хотя бы за 1–2 часа до процедуры.
• Избегать стресса. Постарайтесь избегать физических нагрузок (например, интенсивных тренировок) и эмоционального перенапряжения накануне и в день сдачи анализа.
• Сообщить о принимаемых лекарствах. Обязательно проинформируйте лечащего врача обо всех лекарственных препаратах, которые вы принимаете. Некоторые медикаменты могут влиять на результаты теста.

Интерпретация результатов: о чем говорят цифры

Интерпретацией результатов анализа должен заниматься исключительно лечащий врач, который учитывает не только цифры, но и клиническую картину, данные осмотра и результаты других исследований. Самостоятельная трактовка может привести к неверным выводам и необоснованной тревоге.

Референсные значения (норма) для ревматоидного фактора могут незначительно отличаться в разных лабораториях, так как зависят от используемого метода и оборудования. Обычно нормальные значения составляют менее 14–15 МЕ/мл. Результат выше этого порога считается положительным.

Положительный результат может указывать на:

• Ревматоидный артрит (наблюдается у 70–80% пациентов).
• Другие аутоиммунные заболевания (синдром Шегрена, системная красная волчанка, склеродермия).
• Хронические бактериальные или вирусные инфекции (туберкулез, инфекционный эндокардит, вирусный гепатит).
• Некоторые онкологические заболевания.

Следует помнить, что отрицательный результат на ревматоидный фактор не исключает диагноз «ревматоидный артрит». Примерно у 20–30% пациентов с этим заболеванием РФ не обнаруживается (серонегативный артрит). В таких случаях для диагностики используются другие маркеры, например, антитела к циклическому цитруллинированному пептиду (АЦЦП), и оценка клинических симптомов.

Список литературы

1. Насонов Е.Л. Ревматология: Национальное руководство. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2020. — 998 с.
2. Клинические рекомендации «Ревматоидный артрит». Разработчик: Ассоциация ревматологов России. Утверждены Минздравом РФ, 2021.
3. Кишкун А.А. Руководство по лабораторным методам диагностики. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2007. — 800 с.
4. Smolen JS, Aletaha D, McInnes IB. Rheumatoid arthritis. Lancet. 2016 Oct 22;388(10055):2023–2038.
5. Firestein GS, Budd RC, Gabriel SE, McInnes IB, O'Dell JR. Kelley and Firestein's Textbook of Rheumatology. 10th ed. Elsevier, 2017. — 2192 p.
6. Aletaha D, Neogi T, Silman AJ, et al. 2010 Rheumatoid arthritis classification criteria: an American College of Rheumatology/European League Against Rheumatism collaborative initiative. Arthritis Rheum. 2010 Sep;62(9):2569–81.