ПЦР-диагностика хеликобактер пилори по биоптату: высокая точность

ПЦР-диагностика Helicobacter pylori по биоптату является одним из наиболее точных и современных методов подтверждения наличия этой бактерии в слизистой оболочке желудка. Данное исследование относится к инвазивным, поскольку требует получения биологического материала (биоптата) во время эндоскопической процедуры. Метод полимеразной цепной реакции позволяет выявить ДНК возбудителя даже при его минимальном количестве, что обеспечивает высокую чувствительность и специфичность, делая его незаменимым в сложных диагностических случаях.

Что такое полимеразная цепная реакция и почему она так точна

Полимеразная цепная реакция (ПЦР) — это лабораторный метод, который позволяет найти и многократно скопировать (амплифицировать) определенный фрагмент ДНК в биологическом материале. Если говорить проще, это своего рода «генетический ксерокс». В случае с Helicobacter pylori ПЦР-анализ нацелен на обнаружение уникальных участков генома именно этой бактерии.

Высокая точность метода обусловлена несколькими ключевыми факторами:

• Прямое определение возбудителя. В отличие от некоторых других тестов, которые выявляют косвенные признаки инфекции (например, антитела в крови или продукты жизнедеятельности бактерии), ПЦР-диагностика напрямую находит генетический материал самого микроорганизма. Это исключает ложные результаты, связанные с особенностями иммунного ответа или другими факторами.
• Высокая чувствительность. Метод способен обнаружить даже единичные молекулы ДНК Helicobacter pylori в образце. Это особенно важно при низкой обсемененности слизистой оболочки, когда другие методы могут дать отрицательный результат.
• Высокая специфичность. Анализ нацелен на уникальные гены, присущие только Helicobacter pylori, что практически исключает возможность перекрестной реакции с другими микроорганизмами и, как следствие, ложноположительных результатов.

Для исследования используется биоптат — крошечный фрагмент ткани слизистой оболочки желудка, который врач-эндоскопист берет специальными щипцами во время проведения гастроскопии (ФГДС). Получение такого образца позволяет оценить состояние непосредственно в месте предполагаемого обитания бактерии.

Когда назначают ПЦР-исследование биоптата на Helicobacter pylori

Полимеразная цепная реакция по биоптату не является рутинным методом первичной диагностики из-за своей инвазивности и стоимости. Ее назначают в определенных клинических ситуациях, когда требуется максимальная точность или дополнительная информация, которую не могут предоставить другие тесты.

Вот основные показания для проведения этого анализа:

• Сомнительные или противоречивые результаты других тестов. Если неинвазивные методы (например, дыхательный уреазный тест или анализ кала на антиген) дали неопределенный результат, ПЦР-анализ биоптата помогает поставить окончательный диагноз.
• Контроль после лечения (эрадикации). Для подтверждения полного уничтожения бактерии после курса антибиотиков. ПЦР позволяет убедиться, что в слизистой не осталось даже малого количества микроорганизмов.
• Подозрение на антибиотикорезистентность. Современные ПЦР-тест-системы могут не только выявить ДНК Helicobacter pylori, но и определить наличие генов, отвечающих за устойчивость бактерии к определенным антибиотикам (например, к кларитромицину). Это позволяет врачу сразу назначить эффективную схему лечения.
• Диагностика у пациентов с атрофическим гастритом или после резекции желудка. В этих состояниях плотность заселения бактерией может быть очень низкой, и другие тесты могут быть ложноотрицательными.

Как проходит процедура получения материала для анализа

Материал для ПЦР-исследования получают во время эзофагогастродуоденоскопии (сокращенно ФГДС или гастроскопия). Это процедура, при которой врач осматривает слизистую оболочку пищевода, желудка и двенадцатиперстной кишки с помощью гибкого эндоскопа — тонкой трубки с камерой на конце.

Многих пациентов беспокоит возможный дискомфорт во время исследования. Важно понимать, что процедура проводится с применением местного обезболивания (спрей с анестетиком в горло), а в некоторых случаях — в состоянии медикаментозного сна (седации), что делает ее абсолютно безболезненной и комфортной. Сам процесс взятия биоптата не ощущается пациентом. Врач с помощью миниатюрных щипцов, проведенных через канал эндоскопа, «отщипывает» несколько крошечных фрагментов слизистой (размером с булавочную головку) из разных отделов желудка. Эти образцы немедленно помещаются в специальную стерильную пробирку для отправки в лабораторию на ПЦР-анализ.

Преимущества и недостатки метода ПЦР по сравнению с другими тестами

Чтобы понять ценность ПЦР-диагностики по биоптату, полезно сравнить ее с другими распространенными методами выявления Helicobacter pylori. У каждого подхода есть свои сильные и слабые стороны.

Ниже представлена сравнительная таблица основных методов диагностики:

Как правильно подготовиться к исследованию

Качество подготовки напрямую влияет на достоверность результата ПЦР-диагностики Helicobacter pylori. Несоблюдение рекомендаций может привести к ложноотрицательному результату, когда инфекция есть, но тест ее не обнаруживает. Подготовка включает те же шаги, что и подготовка к стандартной ФГДС, плюс дополнительные ограничения по приему лекарств.

Основные правила подготовки:

• Прекращение приема антибиотиков. Необходимо завершить прием любых антибактериальных препаратов как минимум за 4 недели до исследования.
• Отмена ингибиторов протонной помпы (ИПП). Препараты, снижающие кислотность желудка (омепразол, пантопразол, эзомепразол и др.), следует отменить за 2 недели до процедуры. Эти лекарства подавляют активность Helicobacter pylori, что может снизить количество бактерий в биоптате до неопределяемого уровня.
• Отмена препаратов висмута и блокаторов H₂-гистаминовых рецепторов. Их прием прекращают за 2–4 недели до ФГДС.
• Соблюдение голодной паузы. Исследование проводится строго натощак. Последний прием пищи должен быть не позднее чем за 8–10 часов до процедуры. В день исследования нельзя пить, курить и жевать жвачку.

Перед отменой любых назначенных препаратов необходимо проконсультироваться с лечащим врачом.

Интерпретация результатов ПЦР-диагностики

Результаты исследования, как правило, предельно ясны и не требуют сложной расшифровки. Лаборатория выдает заключение, в котором указан один из двух возможных вариантов.

• «Обнаружено» (или «Положительно»). Этот результат означает, что в предоставленном образце биоптата найдена ДНК Helicobacter pylori. Он с высокой степенью достоверности подтверждает наличие активной инфекции.
• «Не обнаружено» (или «Отрицательно»). Это означает, что в образце ДНК бактерии не выявлена. При соблюдении всех правил подготовки такой результат с высокой вероятностью свидетельствует об отсутствии инфекции.

Дополнительно в заключении может содержаться и другая важная информация. Некоторые тест-системы для полимеразной цепной реакции позволяют проводить количественный анализ, то есть определять бактериальную нагрузку (количество копий ДНК в образце). Также, как уже упоминалось, может быть проведено генотипирование для выявления мутаций, связанных с устойчивостью к антибиотикам. Эта информация бесценна для врача, так как позволяет подобрать наиболее эффективную и персонализированную схему лечения, избегая назначения заведомо неэффективных препаратов.

Список литературы

1. Ивашкин В.Т., Маев И.В., Лапина Т.Л., Шептулин А.А. и др. Клинические рекомендации Российской гастроэнтерологической ассоциации по диагностике и лечению инфекции Helicobacter pylori у взрослых // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. — 2018. — Т. 28, № 1. — С. 55–70.
2. Malfertheiner P., Megraud F., O'Morain C.A., et al. Management of Helicobacter pylori infection—the Maastricht VI/Florence Consensus Report // Gut. — 2022. — Vol. 71, No. 9. — P. 1724–1762.
3. Исаков В.А., Домарадский И.В. Хеликобактериоз. — М.: Медпрактика-М, 2003. — 412 с.
4. Калинин А.В., Логинов А.Ф., Хазанов А.И. (ред.) Гастроэнтерология и гепатология: диагностика и лечение. Руководство для врачей. — 4-е изд. — М.: МЕДпресс-информ, 2017. — 848 с.
5. World Gastroenterology Organisation. Global Guideline: Helicobacter pylori. — 2021.