Лабораторные методы диагностики волчаночного антикоагулянта: обзор тестов

Лабораторные методы диагностики волчаночного антикоагулянта — это комплексный, многоступенчатый процесс, направленный на выявление в крови специфических антител, которые парадоксальным образом влияют на свёртываемость крови. Несмотря на своё название, эти антитела не связаны напрямую с системной красной волчанкой, хотя могут при ней встречаться. Их главная опасность заключается в том, что в организме человека (in vivo) они повышают риск образования тромбов, в то время как в пробирке (in vitro) они, наоборот, замедляют свёртывание крови. Понимание этого парадокса и принципов диагностики крайне важно для своевременного выявления и контроля состояний, связанных с волчаночным антикоагулянтом, таких как антифосфолипидный синдром (АФС).

Что такое волчаночный антикоагулянт и почему его определение так важно

Волчаночный антикоагулянт (ВА) — это не одно вещество, а целая группа аутоантител, то есть антител, атакующих собственные клетки организма. Их мишенью являются фосфолипиды — ключевые компоненты клеточных мембран, в том числе тромбоцитов и клеток, выстилающих сосуды изнутри. Связываясь с фосфолипидами, ВА нарушает нормальную работу системы гемостаза (свёртывания крови).

Определение ВА имеет критическое значение по нескольким причинам:

• Диагностика антифосфолипидного синдрома (АФС). Наличие волчаночного антикоагулянта является одним из ключевых лабораторных критериев для постановки диагноза АФС — состояния, характеризующегося рецидивирующими тромбозами (артериальными и венозными) и/или акушерской патологией (повторяющиеся выкидыши, внутриутробная гибель плода).
• Оценка риска тромбозов. Положительный тест на ВА указывает на повышенную склонность к образованию сгустков крови, что может привести к таким опасным состояниям, как тромбоз глубоких вен, тромбоэмболия лёгочной артерии, инфаркт или инсульт.
• Выяснение причин невынашивания беременности. Присутствие ВА — одна из частых причин привычного невынашивания беременности, так как антитела могут нарушать кровообращение в плаценте.

Важно понимать, что название «волчаночный» исторически связано с тем, что эти антитела впервые были обнаружены у пациентов с системной красной волчанкой. Однако они могут выявляться и при других аутоиммунных заболеваниях, инфекциях, на фоне приёма некоторых лекарств или даже у практически здоровых людей. Поэтому положительный результат теста требует тщательной интерпретации врачом.

Трёхэтапный алгоритм диагностики ВА: от скрининга до подтверждения

Диагностика волчаночного антикоагулянта не может быть выполнена с помощью одного-единственного анализа. Международное общество по тромбозу и гемостазу (ISTH) разработало строгий алгоритм, который включает три последовательных этапа. Это необходимо для того, чтобы надёжно отличить действие ВА от других причин нарушения свёртываемости, например дефицита факторов свёртывания или приёма антикоагулянтных препаратов.

Вот как выглядит этот процесс:

1. Этап 1: Скрининг (Поиск). На этом этапе используются тесты, чувствительные к наличию ингибиторов свёртывания, зависимых от фосфолипидов. Если в плазме пациента присутствует волчаночный антикоагулянт, время свёртывания в этих тестах будет удлинено. Основные скрининговые тесты — это активированное частичное тромбопластиновое время (АЧТВ) и тест с разведённым ядом гадюки Рассела (dRVVT).
2. Этап 2: Коррекционные пробы (Смесительные тесты). Чтобы доказать, что удлинение времени свёртывания вызвано именно ингибитором (как ВА), а не нехваткой факторов свёртывания, плазму пациента смешивают в пропорции 1:1 с нормальной донорской плазмой (в которой все факторы присутствуют в достаточном количестве). Если время свёртывания нормализуется (корригируется) — значит, причина была в дефиците факторов. Если же удлинённое время свёртывания сохраняется, это указывает на наличие ингибитора.
3. Этап 3: Подтверждающие тесты. На финальном этапе необходимо доказать, что ингибитор действует именно против фосфолипидов. Для этого проводятся тесты с добавлением в реакционную смесь избыточного количества фосфолипидов. Если ингибитором является ВА, то избыток фосфолипидов «нейтрализует» его действие, и время свёртывания значительно укорачивается (нормализуется). Это подтверждает фосфолипид-зависимый характер ингибитора.

Только последовательное прохождение всех трёх этапов и получение соответствующих результатов позволяет лаборатории сделать заключение о присутствии или отсутствии волчаночного антикоагулянта.

Основные виды тестов для выявления волчаночного антикоагулянта

Для реализации трёхэтапного алгоритма диагностики ВА используется несколько различных лабораторных тестов. Рекомендуется использовать как минимум два теста, основанных на разных принципах, так как ни один из них не является на 100% чувствительным ко всем разновидностям волчаночного антикоагулянта.

Ниже представлена таблица с описанием ключевых тестов, применяемых для выявления ВА.

Как правильно подготовиться к сдаче анализа на ВА

Достоверность результатов анализа на волчаночный антикоагулянт напрямую зависит от правильной подготовки. Нарушение правил может привести к ложноположительным или ложноотрицательным результатам, что затруднит постановку верного диагноза. Многих пациентов беспокоит сложность диагностики, но соблюдение простых рекомендаций поможет получить точные данные.

Основные правила подготовки включают:

• Отмена антикоагулянтной терапии. Это самый важный пункт. Препараты, разжижающие кровь (например, гепарин, варфарин, прямые оральные антикоагулянты), напрямую влияют на тесты свёртываемости и могут имитировать присутствие ВА. Анализ следует сдавать не ранее чем через 1–2 недели после отмены варфарина и не менее чем через 48 часов после отмены прямых оральных антикоагулянтов. Важно: любые изменения в приёме препаратов должны быть строго согласованы с лечащим врачом. Самостоятельная отмена лекарств недопустима.
• Время сдачи крови. Кровь для анализа сдаётся утром, натощак. После последнего приёма пищи должно пройти не менее 8–12 часов. Допускается пить чистую негазированную воду.
• Исключение физических и эмоциональных нагрузок. Накануне исследования рекомендуется избегать интенсивных тренировок, стрессовых ситуаций.
• Отказ от курения. Не следует курить как минимум за 30–60 минут до взятия крови.

Обязательно сообщите врачу и персоналу лаборатории обо всех принимаемых лекарствах, так как некоторые из них могут повлиять на результат.

Интерпретация результатов: что означает «положительный» тест на волчаночный антикоагулянт

Получение положительного результата на ВА — это не окончательный диагноз, а важная информация для дальнейших действий. Интерпретировать результаты может только врач, учитывая клиническую картину, историю болезни и данные других обследований.

Ключевым моментом в диагностике является стойкость присутствия волчаночного антикоагулянта. Транзиторный (временный) ВА может появляться на фоне инфекций или приёма лекарств и исчезать самостоятельно. Для подтверждения диагноза антифосфолипидного синдрома требуется повторное выявление ВА в крови через 12 недель или более после первого положительного теста. Это доказывает, что присутствие антител носит постоянный, а не временный характер.

Таким образом, единичный положительный тест — это повод для настороженности и дальнейшего наблюдения. Он указывает на необходимость повторного анализа через определённый промежуток времени и консультации с ревматологом или гематологом для определения дальнейшей тактики. Именно врач, собрав воедино все данные, сможет сделать окончательный вывод о наличии заболевания и необходимости лечения.

Список литературы

1. Антифосфолипидный синдром. Клинические рекомендации / Ассоциация ревматологов России. — М., 2018.
2. Баркаган З. С., Момот А. П. Диагностика и контролируемая терапия нарушений гемостаза. — М.: Ньюдиамед, 2008. — 292 с.
3. Pengo V., Tripodi A., Reber G., et al. Update of the guidelines for lupus anticoagulant detection. Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2009;7(10):1737–1740.
4. Miyakis S., Lockshin M. D., Atsumi T., et al. International consensus statement on an update of the classification criteria for definite antiphospholipid syndrome (APS). Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2006;4(2):295–306.
5. Devreese K. M. J. Antiphospholipid antibody testing and standardization. International Journal of Laboratory Hematology. 2014;36(3):352–363.