Современные методы выявления мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 в лаборатории

Современные методы выявления мутаций в генах BRCA1 и BRCA2 — это высокотехнологичные лабораторные исследования, позволяющие с высокой точностью определить наличие наследственных изменений в ДНК, которые значительно повышают риск развития рака молочной железы, яичников, предстательной железы и поджелудочной железы. Понимание того, какие технологии используются в лаборатории, как они работают и что означают их результаты, дает возможность своевременно оценить риски и разработать вместе с врачом персонализированную стратегию профилактики или ранней диагностики онкологических заболеваний. Это знание превращает тревогу и неопределенность в конкретный план действий по защите своего здоровья.

Что такое гены BRCA1 и BRCA2 и почему важно искать в них мутации

Гены BRCA1 и BRCA2 в норме выполняют критически важную функцию в организме каждого человека. Это гены — супрессоры опухолевого роста, проще говоря, «защитники» нашего генома. Они производят белки, которые участвуют в репарации (починке) повреждений ДНК, тем самым поддерживая стабильность генетического материала клеток. Когда в одном из этих генов происходит «поломка» — патогенная мутация, — его защитная функция нарушается. Клетки с поврежденной ДНК перестают эффективно восстанавливаться, что создает условия для их бесконтрольного деления и, как следствие, многократно увеличивает риск развития злокачественных опухолей на протяжении жизни.

Важно понимать, что выявление мутации в генах BRCA1 или BRCA2 не является диагнозом рака. Это информация о предрасположенности, о повышенном риске. Обладая этой информацией, человек получает уникальный шанс действовать на опережение: регулярно проходить специальные обследования для раннего выявления возможных опухолей, обсуждать с врачом медикаментозную профилактику или превентивные операции. Поиск этих мутаций особенно важен для людей, у которых в семье уже были случаи рака молочной железы или яичников, особенно в молодом возрасте.

Основные лабораторные методы для анализа генов BRCA

Для обнаружения изменений в генах BRCA1 и BRCA2 лаборатории используют несколько передовых технологий. Выбор конкретного метода зависит от клинической задачи: нужен ли полный анализ генов или поиск конкретных, наиболее частых мутаций. Все эти подходы направлены на «прочтение» генетического кода и выявление в нем опасных ошибок.

• Секвенирование нового поколения (NGS). Это наиболее мощный и всеобъемлющий метод на сегодняшний день. NGS позволяет полностью «прочитать» последовательность ДНК в генах BRCA1 и BRCA2, выявляя практически любые типы мутаций, включая редкие и ранее не описанные. Технология работает по принципу параллельного анализа миллионов коротких фрагментов ДНК, что делает исследование быстрым и относительно недорогим в пересчете на объем полученной информации. NGS является золотым стандартом для первичной диагностики у пациентов с подозрением на наследственный раковый синдром.
• Полимеразная цепная реакция (ПЦР). Этот метод используется для прицельного поиска конкретных, заранее известных мутаций. Например, в некоторых популяциях есть несколько «частых» мутаций, которые вызывают большинство наследственных случаев рака. ПЦР позволяет быстро и с высокой точностью проверить, есть ли у пациента именно эти конкретные изменения. Это менее затратный анализ, чем NGS, но он не позволяет исследовать весь ген целиком и может пропустить редкие мутации.
• Мультиплексная лигазно-зависимая зондовая амплификация (MLPA). Этот метод является важным дополнением к секвенированию. Он предназначен для выявления крупных перестроек в генах — делеций (потери больших участков гена) или дупликаций (удвоения). Такие изменения не всегда могут быть обнаружены с помощью NGS или ПЦР. Поэтому для максимальной полноты диагностики часто используют комбинацию NGS и MLPA.
• Секвенирование по Сэнгеру. Этот метод считается классическим «золотым стандартом» генетического анализа. Он обладает очень высокой точностью, но позволяет анализировать лишь короткие участки ДНК за один раз. Сегодня его редко используют для первичного скрининга всех генов BRCA1/2 из-за трудоемкости и высокой стоимости. Однако секвенирование по Сэнгеру незаменимо для подтверждения мутаций, выявленных с помощью NGS, особенно если результат неоднозначный.

Сравнительная характеристика методов: какой выбрать

Выбор метода генетического тестирования зависит от целей исследования и клинической ситуации пациента. Чтобы вам было проще сориентироваться, ниже представлена сравнительная таблица основных технологий.

Как проходит тестирование: от взятия биоматериала до получения результата

Путь от решения сдать анализ до получения заключения состоит из нескольких понятных этапов. Знание этого процесса поможет снизить беспокойство и подготовиться к каждому шагу.

1. Консультация с врачом-генетиком или онкологом. Это первый и самый важный шаг. Специалист оценит ваш семейный и личный анамнез, определит, есть ли показания к тестированию, и поможет выбрать оптимальный метод исследования. Врач также объяснит возможные результаты и их значение.
2. Сдача биоматериала. Для анализа чаще всего используется венозная кровь. Процедура ничем не отличается от обычного взятия крови из вены и не требует сложной подготовки (обычно рекомендуется сдавать натощак). В некоторых случаях в качестве материала может использоваться слюна. Это абсолютно безболезненная и быстрая процедура.
3. Лабораторный этап. После поступления в лабораторию из вашего образца выделяют ДНК. Затем с помощью выбранного метода (например, NGS) проводят анализ генов BRCA1 и BRCA2. Этот процесс занимает от нескольких дней до нескольких недель. Современное оборудование и строгий контроль качества на всех этапах обеспечивают высокую точность исследования.
4. Получение и интерпретация заключения. Результат анализа оформляется в виде официального заключения. Расшифровку результатов необходимо проводить только вместе с врачом, который назначил исследование. Специалист объяснит, что означает найденный вариант, какие риски с ним связаны и какой дальнейший план действий является наиболее целесообразным.

Расшифровка результатов: что означают формулировки в заключении

Получив заключение лаборатории, вы можете столкнуться с несколькими вариантами формулировок. Крайне важно не пытаться интерпретировать их самостоятельно, так как это может привести к неверным выводам и излишнему стрессу.

• Патогенная мутация обнаружена (положительный результат). Это означает, что в одном из генов, BRCA1 или BRCA2, найдено изменение, которое нарушает его нормальную работу и достоверно связано с повышенным риском развития рака. Это не диагноз, а важный сигнал для разработки стратегии профилактики и наблюдения вместе с лечащим врачом.
• Патогенные мутации не обнаружены (отрицательный результат). Это означает, что в ходе исследования в генах BRCA1 и BRCA2 не было найдено известных опасных мутаций. Это значительно снижает вероятность наследственного рака, связанного именно с этими генами. Однако это не исключает риск развития рака по другим причинам, поэтому общие рекомендации по скринингу (например, маммография) остаются в силе.
• Обнаружен вариант с неясной клинической значимостью (VUS, Variant of Uncertain Significance). Это одна из самых сложных для восприятия ситуаций. Такая формулировка означает, что в гене найдено изменение, но на текущий момент у науки недостаточно данных, чтобы однозначно сказать, является ли оно опасным (патогенным) или безвредным (доброкачественным). Это не повод для паники. В такой ситуации врач-генетик может порекомендовать наблюдение, обследование родственников (чтобы проследить, связан ли этот вариант с раком в семье) и периодический пересмотр статуса этого варианта, так как научные данные постоянно накапливаются.

Точность и надежность генетического тестирования на BRCA1 и BRCA2

Современные лабораторные методы, особенно комплексное использование NGS и MLPA, обладают очень высокой аналитической точностью. Это означает, что если мутация присутствует в образце, вероятность ее обнаружения (чувствительность метода) превышает 99%. Лаборатории проходят строгий контроль качества и используют международные стандарты для интерпретации генетических вариантов, что обеспечивает надежность результатов.

Тем не менее, важно осознавать, что генетика — это постоянно развивающаяся область. Например, отрицательный результат сегодня означает отсутствие известных патогенных мутаций, но не гарантирует, что в будущем не будут открыты новые типы мутаций или другие гены, связанные с наследственным риском. Именно поэтому так важна связь с лечащим врачом и врачом-генетиком, которые следят за последними научными данными и могут скорректировать рекомендации при необходимости.

Список литературы

1. Клинические рекомендации «Рак молочной железы». Министерство здравоохранения Российской Федерации, 2021.
2. Гинтер Е. К., Пузырев В. П., Куцев С. И. Медицинская генетика: национальное руководство. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2022.
3. National Comprehensive Cancer Network (NCCN) Clinical Practice Guidelines in Oncology: Genetic/Familial High-Risk Assessment: Breast, Ovarian, and Pancreatic. Version 1.2023.
4. Richards S., Aziz N., Bale S., et al. Standards and guidelines for the interpretation of sequence variants: a joint consensus recommendation of the American College of Medical Genetics and Genomics and the Association for Molecular Pathology. Genet Med. 2015;17(5):405-424.
5. Бочков Н. П. Клиническая генетика: Учебник. — 4-е изд., доп. и перераб. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2011.